ICS 65.020.30 B 41 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 7235—2020 罗非鱼链球菌病诊断规程 Code of diagnosis for tilapia streptococcosis 行业标准信息服务平台 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 SC/T7235—2020 前业 言 平台 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会（SAC/TC156归Y 本标准起草单位：中国水产科学研究院珠江水产研究所。 本标准主要起草人：张德锋、石存斌、刘鹏威、任燕、王庆、曾伟伟、潘厚军、常藕琴。 行业标准信息服务平台 SC/T7235—2020 罗非鱼链球菌病诊断规程 1范围 本标准给出了罗非鱼链球菌病诊断所需试剂和材料、器材和设备、临床症状，规定了采样、细菌分离与 纯化培养、生理生化鉴定、PCR检测与综合判定等方法 本标准适用于罗非鱼链球菌病的流行病学调查、诊断和监测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的 凡是不注日期的引用文件 GB 4789. 9 食品 安全 肠弯山基检验 精微生物 和试刻的质 GB 4789. 28 全国家际 食品发 微生物 质量要求 水生动牛 验技术规范 SC/T 7014 06 物验妆 SC/T7201 06人 细菌病检发技术规程 S 缩略语 下列缩略 16SrRN S核糖 体RNAC ribosom BHI:脑心 夜肉汤坊 bp:碱基刘 asepair CTAB: ammonium CENTER DNA：脱氧 糖磁酸 核 dNTPs:脱 磷酸(deox EDTA:Z H202：过氧化 PCR：聚合酶链 opo SDS：十二烷基硫酸钠（odium Taq酶：水生栖热菌 plunerase Tris：三羟甲基氨基甲 V.P：伏-普反应（Voges-Prosl uertest) 醇厚试验 4试剂和材料 除非另有说明，标准中使用的水为蒸馏水、去离子水或与其相当纯度的水。 4.1 4.216SrRNA基因序列扩增引物27F:5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG3'，1492R：5'-TACG GYTACCTTGTTACGACTT-3',-20℃保存。 4.3dNTPs（各10mmol/L），含dATP、dTTP、dGTP、dCTP各10mmol/L的混合物，一20℃保存。 4.410XPCR缓冲液，无Mg+离子，一20℃保存。 4.5TagDNA聚合酶（5U/μL)，-20℃保存。 4.6细菌生化鉴定管或生化鉴定卡，商品化试剂。 4.7 脑心浸液肉汤琼脂培养基见附录A中的A.1。 4.8 血琼脂平板见A.2。