(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210561281.2 (22)申请日 2022.05.23 (71)申请人 北京市农林科 学院 地址 100097 北京市海淀区西郊板 井彰化 路50号 (72)发明人 李盼　王正　张凤兰　于拴仓　 苏同兵　王利敏　武语笛　李晖　 (74)专利代理 机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 专利代理师 何叶喧 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/686(2018.01) (54)发明名称 芸薹种植物叶缘裂刻性状相关的分子标记 及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种芸薹种植物叶缘裂刻性 状相关的分子标记及其应用。 本发 明提供了鉴定 植物的叶缘裂刻性状的方法： 检测植物基于 Indel LMR的基因型， A基因型植物的 叶缘表型为 叶缘裂刻， B基因型植物的叶缘表型为叶缘全缘， H基因型植物的叶缘表型为叶缘裂刻； 基因型判 断方法： 如2条同源染色体均不含有Indel  LMR， 为A基因型； 如 2条同源染色体均含有 Indel LMR， 为B基因型； 如1条同源染色体含有 Indel LMR， 另 1条同源染色体不含有Indel  LMR， 为H基因型； Indel LMR如SEQ  ID NO： 1所示。 本发明开发了与 叶缘裂刻性状紧密连锁的分子标记， 利用分子标 记辅助选择可以在早期对幼苗进行准确稳定的 选择， 从而 减少工作量， 加快育种进程。 权利要求书1页 说明书8页 序列表3页 附图1页 CN 114921582 A 2022.08.19 CN 114921582 A 1.一种鉴定或辅助鉴定植物的叶缘裂刻性状的方法， 包括如下步骤： 检测植物基于 Indel LMR的基因型， A基因型植物的叶缘表型为 或候选为叶缘裂刻， B基因型植物的叶缘表 型为或候选为叶缘全缘， H基因型植物的叶缘表型为或候选为叶缘裂刻； 基于Indel  LMR的基因型的判断方法如下： 如果植物的2条同源染色体均不含有所述 Indel LMR， 其基因型为A 基因型； 如果植物的2条同源染色体均含有所述Indel  LMR， 其基因 型为B基因型； 如果植物的1条同源染色体含有所述Indel  LMR， 另1条同源染色体不含有所 述Indel LMR， 其基因型为H基因型； 所述Indel LMR为DNA分子， 如SEQ  ID NO： 1所示； 所述植物为芸薹种植物。 2.一种鉴定或辅助鉴定植物的叶缘裂刻性状的方法， 包括如下步骤： 检测植物基于 Indel LMR的基因型， A基因型植物的叶缘表型为 或候选为叶缘裂刻， B基因型植物的叶缘表 型为或候选为叶缘全缘， H基因型植物的叶缘表型为或候选为叶缘裂刻； 基于Indel LMR的基因型的判断方法如下： 以供试植物的基因组DNA为模板， 采用特异引物对进行PCR扩增； 如果PCR扩增仅 显示一 种扩增产物且为384bp， 基因型为A基因型； 如果PCR扩增仅显示一种扩增产物且为1701bp， 基因型为B基因型； 如果PCR扩增显示两种扩增产物且分别为384bp和1701bp， 基因型为H基 因型； 所述特异引物对由IndelLMR ‑F和IndelLMR ‑R组成； IndelLMR ‑F为SEQ ID NO： 2所示的 单链DNA分子； I ndelLMR‑R为SEQ ID NO： 3所示的单链DNA分子； 所述植物为芸薹种植物。 3.一种DNA分子， 命名为 Indel LMR， 如SEQ  ID NO： 1所示。 4.权利要求3所述Indel  LMR作为检测靶标在鉴定或辅助鉴定植物的叶缘裂刻性状中 的应用； 所述 植物为芸薹种植物。 5.特异引物对， 由IndelLMR ‑F和IndelLMR ‑R组成； IndelLMR ‑F为SEQ ID NO： 2所示的单 链DNA分子； I ndelLMR‑R为SEQ ID NO： 3所示的单链DNA分子 。 6.权利要求5所述特异引物对在鉴定或辅助鉴定植物的叶缘裂刻性状中的应用； 所述 植物为芸薹种植物。 7.一种鉴定或辅助鉴定植物的叶缘裂刻性状的试剂盒， 包括权利要求5所述特异引物 对； 所述植物为芸薹种植物。 8.权利要求1或2所述方法在植物育种中的应用。 9.权利要求3所述 Indel LMR在植物育种中的应用。 10.权利要求5所述特异引物对在植物育种中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114921582 A 2芸薹种植物叶缘裂刻性状相关的分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 涉及一种芸薹种植物叶缘裂刻性状相关的分子标记及 其应用。 背景技术 [0002]叶片是植物重要的器官， 在光合产物积累、 气体交换、 营养分配和水分输送中起着 重要作用。 植物叶片在进化过程中为了更好的适应环境， 产生了形态各异的叶片结构， 根据 叶缘裂刻由浅至深分为： 全缘、 浅裂、 深裂甚至一个个小叶单元。 深入挖掘和鉴定控制叶形 态建成的新基因和分子调控机理， 培育形态多样的芸薹种植物新品种是满足不同地区和不 同市场消费需求、 提高环境 适应性的有效途径。 [0003]十字花科芸薹属芸薹种(Brassica  campestris)作物包括大白菜亚种   (ssp.pekinensis)、 普通白菜亚种(ssp.chinensis)和芜菁亚种(ssp.rapa)(文献： 中国白 菜分类的探讨， 园艺学报， 1980年5月， 林维申)， 作物叶片存在大量的形态变异， 不同作物的 叶片形态有很大 的差异。 作为植物光合作用的营养器官， 叶片适度裂刻有利于改良植株的 株型， 提高群体的通风透光性， 增强光合作用效率， 减少病虫害的发生。 此外， 叶片形状与植 物抗逆性密切相关， 研究表明植物叶缘裂刻的产生提高了植物的抗逆性(抗旱、 抗高温、 抗 冻害)和对强光和弱光环境的适应性。 因此， 对叶缘裂刻QTL进 行精细定位和基因功能分析， 不仅能够加快对叶缘裂刻形成分子机制的解析， 也为育种工作提供优良的基因资源和可用 的分子标记， 具有重要的理论及应用价 值。 [0004]叶缘裂刻是一个复杂的数量性状， 受到多种信号途径的影响， 且叶缘裂刻表型需 要在真叶形成和展开后才能展现， 传统的选育方法受发育时期限制， 且费时费力。 开 发与叶 缘裂刻性状紧密连锁的分子标记， 利用分子标记辅助选择可以在早期对幼苗(甚至对种子) 进行准确稳定的选择， 从而减少工作量， 加快育种进程。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供一种芸薹种植物叶缘裂刻性状相关的分子标记及其应用。 [0006]本发明提供了一种鉴定或辅助鉴定植物的叶缘裂刻性状 的方法， 包括如下步骤： 检测植物基于Indel  LMR的基因型， A基因型植物的叶缘表型为或候选为叶缘裂刻，  B基因 型植物的叶缘表型为或候选为叶缘全缘， H基因型植物的叶缘表型为或候选为叶缘裂刻； [0007]基于Indel  LMR的基因型的判断方法如下： 如果植物的2 条同源染色体均不含有所 述Indel LMR， 其基因型为A 基因型； 如果植物的2条同源染色体均含有所述Indel  LMR， 其基 因型为B基因型； 如果植物的1条同源染色体含有所述Indel  LMR， 另1条同源染色体不含有 所述Indel LMR， 其基因型为H基因型； [0008]所述Indel LMR为DNA分子， 如SEQ  ID NO： 1所示。 [0009]本发明还提供了一种鉴定或辅助鉴定植物的叶缘裂刻性状的方法， 包括如下步 骤： 检测植物基于Indel  LMR的基因型， A基因型植物的叶缘表型为或候选为叶缘裂刻，  B基说　明　书 1/8 页 3 CN 114921582 A 3