(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210525416.X (22)申请日 2022.05.16 (71)申请人 北京爱普益 生物科技有限公司 地址 100174 北京市大兴区北京经济技 术 开发区地盛东路1号院爱普益大厦 (72)发明人 郭玉芬　侯晓　王晓静　潘雅姣　 李鑫　邱笑违　 (74)专利代理 机构 北京圣州专利代理事务所 (普通合伙) 11818 专利代理师 王宇航 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) C12Q 1/689(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) C12N 15/11(2006.01)C12R 1/93(2006.01) C12R 1/46(2006.01) C12R 1/35(2006.01) C12R 1/22(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 用于呼吸道病原 微生物检测的引物对、 试剂 盒及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种用于呼吸道病原微生物 检测的试剂盒， 所述试剂盒包括引物组、 探针组、 酶混合液和扩增反应液， 引物组和探针组包括以 下(1)‑(9)中的任 意一组或多组： (1)所述引物对 为用于检测甲型流感病毒特异扩增的引物对， 其 核苷酸序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示； 所述 探针为用于检测甲型流感病毒探针， 其核苷酸序 列如SEQIDNO.3 所示； (2)所述引物对为用于检测 乙型流感病毒特异扩增的引物对。 本发明采用上 述的一种用于呼吸道病原微生物检测的引物对、 试剂盒及其应用， 采用荧光定量PCR技术， 分析样 本中常见的病原微生物， 可用于包括细菌、 病毒 (DNA及RNA病毒)、 支原体、 衣原体等病原微生物 的检测， 简单、 快速， 有助于临床精准治 疗。 权利要求书2页 说明书11页 序列表9页 附图5页 CN 115323074 A 2022.11.11 CN 115323074 A 1.一种用于呼吸道病原微生物检测的试剂 盒， 其特征在于， 所述试剂 盒包括引物组、 探 针组、 酶混合液和扩增反应液， 引物组和探针组包括以下(1) ‑(9)中的任意 一组或多组： (1)所述引物对为用于检测甲型流感病毒特异扩增的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID  NO.1和SEQ  ID NO.2所示； 所述探针为用于检测甲型流感病毒探针， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.3所示； (2)所述引物对为用于检测乙型流感病毒特异扩增的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID  NO.4和SEQ  ID NO.5所示； 所述探针为用于检测乙型流感病毒的探针， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.6所示； (3)所述引物对为用于检测呼吸道合胞病毒特异扩增的引物对， 其核苷酸序列如SEQ   ID NO.7和SEQ  ID NO.8所示； 所述探针为用于检测呼吸道合胞病毒的探针， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.9所示； (4)所述引 物对为用于检测腺病毒特异扩增的引 物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.10 和SEQ ID NO.11所示； 所述探针为用于检测腺病毒的探针， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.12所示； (5)所述引物对为用于检测嗜肺军团菌特异扩增的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID  NO.13和SEQ  ID NO.14所示； 所述探针为用于检测嗜肺军团菌的探针， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.15所示； (6)所述引物对为用于检测肺炎克雷伯菌特异扩增的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID  NO.16和SEQ  ID NO.17所示； 所述探针为用于检测肺炎克 雷伯菌的探针， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.18所示； (7)所述引物对为用于检测肺炎链球菌特异扩增的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID  NO.19和SEQ  ID NO.20所示； 所述探针为用于检测肺炎链球菌的探针， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.21所示； (8)所述引物对为用于检测肺炎支原体特异扩增的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID  NO.22和SEQ ID NO.23所示； 所述探针为用于检测肺炎支原体特异扩增的探针， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.24所 示； (9)所述引物对为用于检测肺炎衣原体特异扩增的引物对， 其核苷酸序列如SEQ  ID  NO.25和SEQ  ID NO.26所示； 所述探针为用于检测肺炎衣原体的探针， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.27所示。 2.如权利要求1所述的一种用于呼吸道病原微生物检测的试剂 盒， 其特征在于： 酶混合 液中包括尿嘧啶糖 基化酶和耐热DNA聚合酶。 3.如权利要求1所述的一种用于呼吸道病原微生物检测的试剂盒， 其特征在于： 还包 括， 所述内标的引物如SEQ  ID NO.28、 SEQ  ID NO.29所示的核苷酸序列， 其探针对如SEQ  ID  NO.30所示的核苷酸序列。 4.如权利要求1所述的一种用于呼吸道病原微生物检测的试剂 盒， 其特征在于： 还包括 阴性对照和阳性对照， 阴性对照为灭菌生理盐水， 阳性对照为含目标片段的混合假病毒或 质粒。 5.一种用于呼吸道病原微生物检测的试剂盒在用于检测病毒类、 细菌类、 支原体和衣权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115323074 A 2原体类病原体中的应用。 6.如权利要求5所述的应用， 其特征在于： 病毒类病原体包括甲型流感病毒、 乙型流感 病毒、 呼吸道合胞病毒、 腺病毒。 7.如权利要求5所述的应用， 其特征在于： 细菌类病原体包括嗜肺军团菌、 肺炎克雷伯 菌、 肺炎链球菌 。 8.如权利要求5所述的应用， 其特征在于： 支原体、 衣原体类病原体包括肺炎支原体、 肺 炎衣原体。 9.一种用于呼吸道病原微生物检测的引物对， 其特征在于： 引物对为如权利要求1中 (1)‑(9)所示引物对中的一组或多组。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115323074 A 3