ICS 65.020.30 B 41 DB37 山 东 省 地 方 标 准 DB 37/T 3676—2019 种猪场伪狂犬病净化技术规范 Technical Regulation of Eradication of Pseudorabies in Swine BreedingFarms 2019 - 08 - 30 发布 山东省市场监督管理局 2019 - 09 - 30 实施 发 布 DB37/T 3676—2019 目 次 前言 ............................................................................... III 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 检测方法 ........................................................................... 2 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 仪器 ........................................................................... 耗材 ........................................................................... 试剂 ........................................................................... 核酸检测 ....................................................................... 血清学检测 ..................................................................... 2 2 2 2 2 5 净化群的建立 ....................................................................... 3 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.6 5.7 净化策略 ....................................................................... 感染状况普查阶段 ............................................................... 强化免疫阶段 ................................................................... 检测与淘汰阶段 ................................................................. 强制净化阶段 ................................................................... 假定健康阶段 ................................................................... 净化场的评估阶段 ............................................................... 3 3 3 4 4 4 4 6 净化场的维持阶段 ................................................................... 4 6.1 6.2 6.3 6.4 免疫 ........................................................................... 监测 ........................................................................... 引种检疫 ....................................................................... 生产记录不佳的种猪检测 ......................................................... 5 5 5 5 7 综合生物安全措施 ................................................................... 5 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 合理的猪场选址 ................................................................. 生产模式 ....................................................................... 饲养管理 ....................................................................... 消毒措施 ....................................................................... 无害化处理措施 ................................................................. 有害生物防治措施 ............................................................... 其它生物安全措施 ............................................................... 档案管理 ....................................................................... 5 5 5 5 6 6 6 6 附 录 A （资料性附录） 猪伪狂犬病免疫无疫评估实验室检测方法及抽样要求 .............. 7 附 录 B （资料性附录） 猪伪狂犬病净化评估实验室检测方法及抽样要求 .................. 8 I DB37/T 3676—2019 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由山东省畜牧兽医局提出并监督实施。 本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省动物疫病预防与控制中心、山东省畜牧总站、山东汇众兽医科技服务公司。 本标准主要起草人：李云岗、张栋、张月、周开锋、楚遵峰、汪洋、王士荣、王敏、曹振山、刘波。 II DB37/T 3676—2019 种猪场伪狂犬病净化技术规范 1 范围 本标准规定了种猪场猪伪狂犬病净化的检测方法、净化群的建立、净化场的维持及综合生物安全措 施。 本标准适用于种猪场猪伪狂犬病净化。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 17823 集约化猪场防疫基本要求 GB/T 17824.2 规模猪场生产技术规程 GB/T 18641 伪狂犬病诊断技术 GB/T 35911 伪狂犬病病毒荧光PCR检测方法 NY/T 1168 畜禽粪便无害化处理技术规范 NY/T 1568 标准化规模养猪场建设规范 DB37/T 2384 种猪场消毒技术规范 《病死及病害动物无害化处理技术规范》 农医发〔2017〕25号 《跨省调运乳用种用动物产地检疫规程》 农牧发〔2019〕2号 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 伪狂犬病 Pseudorabies 伪狂犬病是由疱疹病毒科疱疹病毒Ⅰ型伪狂犬病毒（PRV）引起的猪及多种家畜和野生动物的传染 病。 3.2 净化 eradication 对种猪场采取一系列措施，达到消灭和清除猪伪狂犬病的过程。在某一限定的种猪场内，根据猪伪 狂犬病的监测结果，及时发现并淘汰感染猪只，使种猪群中猪伪狂犬病逐渐被清除的疫病控制方法。 3.3 猪伪狂犬gE基因缺失疫苗 Pseudorabies gEgene-deleted vaccine 利用猪伪狂犬gE基因缺失病毒株所制成的疫苗。 1 DB37/T 3676—2019 4 检测方法 4.1 仪器 4.1.1 荧光 PCR 检测仪。 4.1.2 PCR 仪和凝胶成像系统（根据实验室条件选择，替换 4.1.1）。 4.1.3 高速台式冷冻离心机：可控温至 4 ℃、离心速度可达 12 000 r/min 以上。 4.1.4 组织研磨器或者研钵。 4.1.5 普通冰箱。 4.1.6 微量移液器：0.2 μL～2 μL，1 μL～10 μL，10 μL～100 μL，20 μL～200 μL，100 μ L～1 000 μL。 4.1.7 酶标仪。 4.1.8 恒温箱。 4.1.9 高压灭菌锅。 4.2 耗材 4.2.1 1.5 mL 离心管。 4.2.2 0.2 mLPCR 薄壁管。 4.2.3 酶标板,移液器吸头。 4.3 试剂 4.3.1 4.3.2 4.3.3 4.3.4 4.3.5 4.3.6 4.3.7 4.3.8 除非另有说明，在检测中使用的试剂均为分析纯，实验室用水应符合 GB/T 6682 的要求。 商品化 DNA 抽提试剂，于 4 ℃保存。 无水乙醇，-20 ℃预冷。 75 %乙醇，无水乙醇和双蒸水配制，-20 ℃预冷。 含 dATP、dGTP、dCTP、dTTP 各 10 mmol/L，-20 ℃保存，避免反复冻融。 普通 PCR 引物参照 GB/T 18641。 荧光 PCR 引物和探针参照 GB/T 35911。 酶