ICS 65.020.30 B 41 DB51 四 川 省 地 方 标 准 DB51/T 2485—2018 牛羊血吸虫病乳胶微球试纸条诊断 技术规范 2017 - 04 - 18 发布 四川省质量技术监督局 2018 - 05 - 01 实施 发 布 1 DB51/T 2485—2018 目 次 前 言 ............................................................................... II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 主要仪器设备及耗材 ................................................................ 1 5 试剂 .............................................................................. 2 6 操作步骤 .......................................................................... 2 7 结果判定 .......................................................................... 2 I DB51/T 2485—2018 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由四川省农业厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督局批准。 本标准主要起草单位：四川省动物疫病预防控制中心。 本标准主要起草人：周明忠、阳爱国、毛光琼、陈斌、周哲学、郭莉、侯巍、文豪、莫茜、吴云飞、 袁东波、鲁志平。 II DB51/T 2485—2018 牛羊血吸虫病乳胶微球试纸条诊断技术规范 1 范围 本标准规定了牛羊血吸虫病乳胶微球试纸条诊断技术规范的仪器设备、试剂、操作步骤和结果判定。 本标准适用于各种牛羊的血吸虫病快速诊断（初筛）。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 NT/T 541-2002 动物疫病实验室检验采样方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 动物血吸虫病 由血吸虫寄生于哺乳动物所引起的疾病，在我国特指日本血吸虫病。 3.2 乳胶微球试纸 基于免疫层析技术和抗原抗体反应原理研制。当检测的牛及羊血清或血纸中存在血吸虫抗体时，会 在试纸条的检测线T线和质控线C线位置显色条带；当待检血样中不存在血吸虫抗体时，仅在试纸条的C 线位置显色条带。 3.3 乳胶微球试纸反应原理 可溶性血吸虫虫卵抗原作为包被抗原，显色乳胶微球标记鼠抗人单抗为显色剂的抗原抗体反应。 4 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 主要仪器设备及耗材 低速离心机。 精密可调移液器（20-200 µL）。 一次性滴头。 离心管（1.5 mL）。 离心管架。 1 DB51/T 2485—2018 4.6 5 活页纸打孔器（5.5 mm）。 试剂 5.1 5.2 5.3 6 试剂密封、干燥常温贮存。 乳胶微球试纸条（质检合格）。 生理盐水（0.9% NaCl），试剂配置用水符合 GB/T 6682 的要求。 操作步骤 检测环境温度需保持在22～24 ℃。 6.1 样品准备 血清样品或待检血纸可直接使用，如在三天内进行检测可放置于4℃保存，如一个月内进行检测可 放置-20℃保存。 6.2 血清样品检测 6.2.1 取 200～250 μL 血清加入到 1.5 mL 离心管中。 6.2.2 将试纸条直接插入装待检血清的离心管中，试纸条的背面靠管壁，待试纸条中间渗出水印约 5 mm （水印稍低于离心管口）时，取出试纸条平放在桌面上；亦可将试纸条插在装入血清的试管中 5～8 min 直接观察结果。 6.3 血纸样品检测 6.3.1 用打孔器裁取待检血纸 1 片（0.24 cm2）放到 1.5 mL 离心管中。 6.3.2 用移液器吸取 180 μL 生理盐水加到离心管中，振动离心管使血纸完全浸没于液体中，浸泡 30 min，摇匀，即成血纸浸出液。 6.3.3 将试纸条插入血纸浸出液中（插到管底），试纸条背面靠管壁，待试纸条中间水印渗出约 5 mm （水印稍低于离心管口）时，取出试纸条平放在桌面上。 7 结果判定 7.1 阴、阳性对照成立，结果判定则成立。 7.2 在判定结果前需仔细观察质控线 C 线是否显色或显色是否正常（显色的颜色需见使用说明书）。 7.3 试纸条自插入血样后 3～10 min 内判断结果。若 T 线和 C 线均显色判为阳性；若仅 C 线显色判为 阴性；如果 10 min 后 T 线出现显色条带不能判为阳性，应判为阴性。 _________________________________ 2 DB51/T 2485—2018